样品制备

样品采集与固定

量取2L-5 L海水样本，加入3 mL碳酸镁悬浮液（抑制叶绿素降解）。

真空过滤

使用玻璃纤维滤膜（φ47 mm，0.7 μm孔径），在<50 kPa负压条件下完成过滤。

样品提取

低温萃取

将载样滤膜转移至具塞离心管，加入10 mL90%丙酮溶液。将离心管至于冷藏室避光静置提取24 h。

离心纯化

离心参数设置

将样品放至离心机，离心速度：（3000-4000）r／min；离心时间：10min。

光谱测定

上清液处理

用移液枪吸取上清液时保持枪头距液面2/3深度，避免扰动沉淀层。将澄清液转移至10 mm石英比色皿。

分光光度测定

参数设置：

- 参比液：90%丙酮溶液

- 检测波长：750 nm（浊度校正）、664 nm、647 nm、630 nm

- 检测顺序：750 nm→664 nm→647 nm→630 nm

- 质量控制：当750 nm处吸光值＞0.005（1 cm光程）时需重新离心

注意事项

1. 实验全程佩戴丁腈手套，丙酮操作应在通风橱进行

2. 比色皿使用前后需用丙酮润洗三次

3. 建议设置平行样，相对偏差应＜5%

4. 检测需在离心后30 min内完成，避免色素降解